Penyediaan Bagi Media Tisu Kultur

Aip, guys, lame xupdate something, so kali ni ak nk update n share skit ilmu yang ak pelajari dalam dunia pertanian ni. Mcm mne nak wat media untuk tisu kultur. sebenarnye byk formula nak wat media ni tp, kebanyakkan menggunakan formulasi media murashige & skoog, 1962 (MS Media). So tgok la kt bawah ni langkah2 dia tok hasilkn 1 liter media.

Langkah 1 : Senarai bahan formulasi MS Media beserta kuantiti.

·                     Macro nutrient

o     Ammonium nitrate (NH4NO3) (1,650 mg/l)

o     Calcium chloride (CaCl2 · 2H2O) ( 440 mg/l)

o     Magnesium sulphate (MgSO4 · 7H2O) (370 mg/l)

o     Potassium phosphate (KH2PO4) ( 170 mg/l)

o     Potassium nitrate (KNO3)  (1,900 mg/l)

·                     Mikro nutrient

o     Boric acid (H3BO3) (6.2 mg/l)

o     Cobalt chloride (CoCl2 · 6H2O) (0.025 mg/l)

o     Cupric sulphate (CuSO4 · 5H2O) (0.025 mg/l)

o     Manganese sulphate (MnSO4 · 4H2O) (22.3 mg/l)

o     Potassium iodide (KI)( 0.83 mg/l)

o     Sodium molybdate (Na2MoO4 · 2H2O)( 0.25 mg/l)

o     Zinc sulphate (ZnSO4·7H2O) (8.6 mg/l)

·                     Iron

o     FeSO4. 7H2O (27.8 g)

o     Na2 EDTA (37.8)

·                     Sucrose (30,000 mg)

·                     Agar (8000mg)

·                     Ph (5.8)

Langkah 2 : Setelah bahan tersedia, sediakan beaker yang siap diisikan air suling dlm kuantiti 600ml-700ml. Kemudian, masukkan bahan-bahan tersebut ke dalam beaker satu per satu dan pastikan jumlahnya 100 ml. Kalau xcukup, tmbah je air suling.

·                     Makro nutrient (100 ml)

·                     Mikro nutrient (10 ml)

·                     Iron (10 ml)

·                     Vitamin (10 ml)

·                     Sucrose (30 mg)

·                     Agar (8 g)

·                     Air suling

Langkah 3 : Bahan-bahan yang telah siap dimasukkan diletakkan di atas electronic balance dan dengan menggunakan magnatic stirrer, pastikan bahan-bahan digaul dengan sekata.

Langkah 4 : Periksa pH larutan media agar mencapai pH 5.8 dan seandainya terlebih, gunakan HCI untuk mengurangkan pH manakala jika berkurang, gunakan NaoH. pH ni leh la check pkai pH meter.

Langkah 5 : Setelah selesai, masukkan larutan media ke dalam balang kecil  sekurang-kurangnya mencecah  ketebalan 2 cm (anggaran).

Langkah 6    : Masukkan semua balang kecil yang mengandungi media tisu kultur ke dalam autoclave bagi tujuan penstrilan untuk mematikan bakteria mahupun bendasing yang boleh mengganggu pertumbuhan benih kelak.

Langkah 7    : Setelah selesai, alihkan balang tersebut ke dalam liminar flow yang telah dibasmi dengan alcohol dan kemudian tutup serta diikat balang dengan pita parafilem agar media itu tidak dimasuki bakteria mahupun virus. klau nk gunekan segera, xyh ikat dlu, masokkn benih atau organ tumbuhan yang nk digunakan, baru ikan. 

mcm tu la cara2nya nak hasilkan media tok tisu kultur, so lepas ni aku akn update plak psal langkah seterusnye tau,

sekian,,,